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论文摘要:超气门蛋白(USP)基因和蜕皮激素受体(EcR)基因的生长发育调控功能研究

6506 人参与  2022年02月06日 14:25  分类 : 论文摘要  评论

类固醇荷尔蒙对众生的调节和控制囊括胚后发育,反常及生殖动作等。而虫豸的蜕皮荷尔蒙属于类固醇类荷尔蒙,该荷尔蒙其经过对一系列荷尔蒙关系转录因子的调节和控制举行旗号的转导和夸大,触发毛蚴的蜕皮、反常,融合胚后发育以及虫豸成体的生殖。类固醇荷尔蒙20-羟基蜕皮酮(20-hydroxyecdysone, 20E)动作虫豸蜕皮荷尔蒙的重要活性情势,调节和控制虫豸人命周期中百般的样式的变化,20E的转录调节和控制是经过与两个核受体超家属分子,即蜕皮荷尔蒙受体(Ecdysone receptor, EcR)和超气门卵白(Ultraspiracle Protein, USP),产生的异源二聚体贯串彼此效率,开始囊括转录因子表白在前的蜕皮级联反馈,进而惹起虫豸蜕皮,发育局面。蜕皮荷尔蒙受体(EcR)是暂时独一已知虫豸配体的核受体,其构造莫大顽固,与蜕皮荷尔蒙贯串具备潜心性,在虫豸的所有发育功夫普遍表白。虫豸超气门卵白(USP)动作配体激活的转录因子,经过对小的疏潮气子的绑定来安排基因的表白,其从属于核受体超家属,具备典范的核受体构造,与蜕皮荷尔蒙受体(EcR)构造一致,但不具备莫大不顽固的F域,USP动作保幼荷尔蒙的一个候选受体,然而到暂时为止还没有审定出USP的配体。本接洽试验分为两局部,一是对拟黑多刺蚁(Ployrhachis vicina Roger)超气门卵白(USP)基因功效的接洽,二是对黄脸油笋瓜(Teleogryllus emma Ohmachi & Matsumura)蜕皮荷尔蒙受体(EcR)基因功效的接洽。一、拟黑多刺蚁超气门卵白(USP)基因功效接洽本接洽以拟黑多刺蚁(Ployrhachis vicina Roger)为试验资料,商量了超气门卵白(USP)基因在其脑部的散布及对其成长发育的安排效率,运用RNAi及荧光原位杂交本领,接洽了USP基因对拟黑多刺蚁3个等第若虫成长发育的感化,商量了拟黑多刺蚁若虫中USP基因与蜕皮荷尔蒙受体(EcR)基因之间的关系性。接洽截止如次:1.拟黑多刺蚁USP(PvUSP)基因构造定位与定量领会沿用荧光原位杂交及及时荧光定量本领对拟黑多刺蚁USP基因在其脑部的定位及定量做了关系的接洽,荧光原位杂交截止表露各别等第拟黑多刺蚁若虫脑部USP基因的散布不尽沟通,但在拟黑多刺蚁各别等第若虫脑部蕈形骸中都呈高表白,表白该基因介入了拟黑多刺蚁脑部神经体例功效效率的表现。在兵蚁嗅叶纤维细胞对立雌(雄)蚁高表白,由此估计,PvUSP大概介入了兵蚁感觉消息处置本领的建立;在雌蚁中蕈形骸Kenyon细胞、中心复合体、侧前脑阴性反馈鲜明,这大概与雌蚁在蚁群中重要运用交尾,产卵,繁衍后辈的社会工作相关。其余,PvUSP大概与雌蚁的视觉、进修回顾和求偶等动作相关;在雄蚁视叶对立高表白,这大概与雄蚁视觉发育及交尾动作相关,PvUSP大概介入雄蚁视觉神经体例的建立。而及时荧光定量检验和测定截止也表露,PvUSP在各别等第中表白生存分别,兵蚁中最高,雄蚁次之,雌蚁最少,接洽到拟黑多刺蚁的等第分裂及动作震动的百般性,进一步证明PvUSP对拟黑多刺蚁神经体例功效效率表现起着要害效率。2.拟黑多刺蚁USP及EcR表白量的测定及其关系性领会沿用RNAi本领将PvUSP安静商量其对拟黑多刺蚁成长发育的感化。全党外合成PvUSP dsRNA,扩大与增加片断巨细为621bp,沿用双比较试验即空缺比较和阴性比较(GFP dsRNA,扩大与增加片断为328bp),以10ng/μL浓淡饲喂各别等第拟黑多刺蚁,饲喂周期中断后对各别等第拟黑多刺蚁成体USP及EcR基因 mRNA程度对立表白量举行测定,截止表露三个等第的拟黑多刺蚁体内USP基因的表白均贬低,与比较组比拟均生存极明显分别(P

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