免费论文摘要：以小檗碱为荧光探针辨别G-四聚体DNA构造及钾离子的荧光法测定

21世纪是生命科学快速发展的时期。荧光分析方法由于其灵敏度高、选择性好、简单快速等优点，在寿命分析中得到了广泛的应用。本论文建立了两种基于DNA序列无标记荧光分析的新方法。具体工作如下： 1、以小檗碱为荧光探针，鉴定G-四聚体DNA的结构及钾离子的荧光测定，小檗碱（Berberine，BR）是一种从植物中提取的异喹啉类生物碱。它是一种部分带正电的平面结构药物，具有可膨胀的离域π-π体系，在水溶液中几乎不发光。荧光。研究表明，黄连素具有良好的抗肿瘤作用。 G-四聚体由富含 G 的寡核苷酸序列形成的四聚体之间的非共价 π-π 堆叠形成。我们的研究发现黄连素在单链DNA、双链DNA和G-四聚体DNA存在下具有不同的荧光特性。与单链DNA和双链DNA相比，G-四聚体DNA可以与小檗碱发生强烈的相互作用，形成具有强荧光的小檗碱-G-四聚体复合物。可见小檗碱可作为荧光探针识别G-四聚体DNA结构。另一方面，针对小檗碱-G-四聚体体系在不同离子（Na+、K+）条件下荧光强度不同的现象，建立了一种简便灵敏的钾离子荧光测定新方法。对该系统的实验条件进行了详细优化。在选定的最佳实验条件下，钾离子浓度在5.0×10-6-1.0×10-3 M范围内与小檗碱-G-四聚体体系的荧光差（F-F0）具有良好的线性关系，相关系数为0.9967。紫外可见吸收光谱、荧光光谱、圆形用二色谱法讨论了该体系的荧光发射机理。与其他分析方法相比，该方法具有操作简单、灵敏度高、选择性高、线性范围宽等优点。此外，使用小檗碱作为探针还具有易商购、无毒等优点。并可成功应用于尿样中钾离子含量的测定。 2. 以亮绿为荧光探针的无标记DNA序列杂交检测 亮绿(BG)是一种碱性三苯甲烷染料，自身几乎不发荧光。当将双链 DNA 添加到亮绿色溶液中时，我们观察到亮绿色荧光显着增加，而在亮绿色溶液中添加单链 DNA 时则没有观察到。受这一实验现象的启发，我们建立了一种新的无标记、均相荧光分析方法，用于检测 DNA 序列杂交。对该系统的实验条件进行了详细优化。在选定的最佳实验条件下，靶DNA浓度与系统的荧光比（F/F0）在3.0×10-8-4.0×10-6 M范围内具有良好的线性关系，相关系数为 0.9994。研究表明，这种荧光探针可以清楚地区分完全匹配的DNA序列和一个碱基错配、三个碱基错配和完全碱基错配的DNA序列。所以这种荧光探针具有很高的选择性。采用紫外-可见吸收光谱、荧光光谱、荧光偏振和圆二色性等方法研究了亮绿色与DNA分子的相互作用机理。与经典的嵌入剂溴化乙锭 (EB) 相比，亮绿对 DNA 序列杂交的检测比溴化乙锭更敏感。

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