免费论文摘要：茶树MADS-box 家属B类基因CsGLO1和CsGLO2的克隆及其与C类基因CsAG的功效接洽

茶树(Camellia sinensis (L.) O. Kuntze)是我国要害的叶用财经植被，具备茶花属植被私有的“花果同现”局面，即从花芽产生到健将老练，历时一年半安排。在此进程中，长久的花和果必定会对叶片的成长形成养分比赛。所以，控制茶树生殖成长是激动茶树养分成长，普及茶树叶片产量和品质的要害道路之一。茶树动作中心真双完全叶植被，花具备典范四轮花器官。雄蕊和雌蕊动作茶树花器官的要害构造，既径直介入有性繁衍，也是果子产生的样式普通。按照新颖植被花发育“ABCDE模子”等接洽创造，B类和C类基因对花的性别分裂和功效发育具备要害效率。所以有需要发展茶树B类和C类MADS-box基因的克隆及其介入成长发育的分子机理接洽。接洽截止的赢得，不只为茶树有性繁衍的遗传学接洽供给科学按照，也可为此后经过育种或培植本领从性器官官分裂的泉源上控制“花果同现”局面，激动茶树叶片成长奠定表面普通。本接洽以陕西省秦巴山国代办性茶树种质‘紫阳槠叶种’(Camellia sinesis cv. Ziyangzhong)为资料，经过同源克隆和RACE本领从已实行分裂的茶树花芽中胜利赢得了两个B类MADS-box同源基因CsGLO1和CsGLO2的cDNA序列全长，并举行了底栖生物消息学猜测和体例进化领会；其余，经过拟南芥(Arabidopsis thaliana)异位表白本领对CsGLO1、CsGLO2和CsAG基因举行了功效领会，还运用及时荧光定量PCR、亚细胞定位领会、转录激活活性领会和酵母双杂交本领发端领会了这3个基因在茶树花发育进程中的效率机理。重要论断如次：1. 运用RT-PCR和RACE本领，以‘紫阳槠叶种’已分裂花芽为资料，克隆到两个源代码框辨别为630bp和627bp的cDNA序列。经BLASTN比对领会和底栖生物消息学猜测，这两个茶树基因与GenBank数据库中的茶花(Camellia japonica )、油茶面儿(Camellia oleifera)、羊桃(Actinidia chinensis)、拟南芥和金鱼草(Antirrhinum majus)等多个物种的PI/GLO同源基因一致，且都具备顽固的MADS域、K域和PI基序。故辨别定名为CsGLO1和CsGLO2，GenBank登录号为KJ630568和KJ630569。    2. 对CsGLO1和CsGLO2源代码卵白举行顽固构造域领会、亚细胞定位猜测、疏水性/亲水性领会、二级构造猜测、同源建立模型三维构造猜测和同源性比对领会表白：CsGLO1、CsGLO2属于花发育B类基因，源代码MIKC类MADS-box转录因子，且在基因表白调节和控制上大概与其余MADS-box转录因子效率体制一致；体例进化领会表露CsGLO1和CsGLO2属于基部菊类植被PI家属，且PI/GLO同源基因序列一致性与物种亲源联系呈鲜明正关系，证明PI/GLO转录因子经过顽固多肽片断产生基序从而产生一致的高档构造表现底栖生物学功效。3. 及时荧光定量PCR截止表露，CsGLO1和CsGLO2重要在花瓣、雄蕊和果子中表白，CsAG则洪量出此刻雄蕊、心皮和果子中，展现出茶树CsGLO1、CsGLO2和CsAG基因表白形式鲜明的种属奇异性。动作花器官特性基因，CsGLO1和CsGLO2大概动作一个功效单元，在第二轮花器官中高表白共通调节和控制花瓣发育，同声与高表白的CsAG基因共通调节和控制第三轮车花器官的发育；而第四轮花器官重要受CsAG基因调节和控制；其余，这3个基因在果子中的高表白还表示它们大概共通介入茶树果子的成长发育。    4. 拟南芥中的异位表白截止表露，35S::CsGLO1和35S::CsGLO2转基因拟南芥植株表型一致，萼片鲜明张开且边际展示白色花瓣状构造，35S::CsAG转基因植株展现早花、叶弯曲、花瓣各别水平缺点和失误、增厚委曲的萼片上展示柱头和胚珠，表白在花发育进程中茶树CsGLO1、CsGLO2和CsAG基因功效顽固且CsGLO1和CsGLO2基因的序列分别并不许引导实足的功效分裂，它们大概动作一个功效单元彼此冗余步调节和控制茶树的成长发育。     5. 亚细胞定位领会、转录激活活性试验和酵母双杂交试验创造，CsGLO1、CsGLO2和CsAG卵白是完备审定位本领、但无转录激活活性的转录因子且两两间彼此效率能产生异源二聚体。表示着茶树CsGLO1、CsGLO2和CsAG大概须要经过与其余转录因子贯串获得转录调节和控制活性介入花发育调节和控制，经过产生异源二聚体，CsGLO1和CsGLO2大概动作一个功效单元介入茶树的成长发育，同声也反应出CsGLO1和CsGLO2基因具备一致的功效。

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