论文摘要：电镜下突触定位的方法学研究

皮质脊髓束(Corticospinal Tract，CST)是连接大脑与脊髓前角运动神经元间的神经通路，传递大脑发出的运动指令，支配骨骼肌的随意运动。脊髓损伤导致皮质脊髓束功能障碍，引起损伤平面以下各种运动、感觉功能障碍。脊髓损伤修复过程中，皮质脊髓束轴突再生和运动神经元与皮质脊髓束间突触结构重建，对恢复神经传导及重建肢体运动功能具有十分重要的意义。皮质脊髓束在脊柱内下行，在脊髓不同层面与大量的运动神经元、中间神经元、脊髓固有神经元形成数量众多的突触，这些突触在超微结构上并无明显区别。单独使用神经示踪或免疫电镜技术，无法准确定位皮质脊髓束与前角运动神经元间的突触结构，而利用荧光免疫标记和激光共聚焦显微技术，虽然能够对突触结构进行定位研究，但分辨率较低，无法在超微结构水平上观察突触形态。本研究将神经示踪、免疫电镜和激光共聚焦显微技术相结合，利用神经示踪技术追踪大鼠皮质脊髓束，胶体金免疫电镜技术标记脊髓前角运动神经元中的胆碱乙酰合成酶（Choline Acetyltransferase，ChAT），激光共聚焦显微镜定位皮质脊髓束与运动神经元间突触的位置，在透射电镜（Transmission Electron Microscope, TEM）下观察该突触的超微结构。实验结果表明，本方法能够为脊髓损伤修复模型的形态学评价提供可靠的技术支持，细胞超微结构清晰，突触定位准确。

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